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大きなプラスミドの精製ってどうやるの?

1 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/12 21:13
大きなプラスミド(たぶん150kbpくらい)をゲノムが混入しない形で精製するにはどうしたら良いのでしょうか?
パルスフィールドを使っても、どうしても断片化されたゲノムが混入してしまうのですが・・・
知っている人いたらお願いします。

2 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/12 21:50
CsCl密度勾配で一発

3 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/12 21:51
そんなでかいプラスミドがあるのか?

4 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/12 22:05
プラスミド怖い…

5 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/12 22:17
QIAGEN Large Consutuction Kit

6 :でらえもん調査局ヽ(`Д´)ノ ◆MS06S/xs :02/09/12 23:43
>>1しわしわしわー
\(^▽^)/新スレおめー
100式につや消しパピコぬりまくり.りんねおかわりは30円.あさみ売り切れ
モニフラinぶりんこ天然果汁1000%
           ___ ______   ───────────…‥
          /日 「  日\_.\    ━━━━━━━━━…‥
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()_____|_日(´D` ))(@)_二〉 ̄,ー' ゞ ⌒ヾ∠_─────…‥
       \|乙/∪∪=/__/__二二,新スレおめ〜  =- 三ニ=−──…‥
          <_,<、二ニ_/ ̄ ̄   //_  く ̄ ━━━━━━━…‥
           l/   l/^ー'      / / ∨.N \  ─────…‥









                                                                 ∋oノハヽo∈
                                                             ⊂' ⌒つ川o・−・)つ マローン

7 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/13 00:48
何に使うの?プラスミド

8 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/13 03:07
CsClを2回かな。

9 :七海 ◆DQN/lDo. :02/09/13 03:41
こすみど?にしてもデカイよね。


10 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/13 03:52
アホ?おまえら
BACも知らねえのか?
死んでこい

11 :七海 ◆DQN/lDo. :02/09/13 08:02
あーBACだ。芯できます。

12 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/13 08:30
BACってなんですか?
ど素人にもわかりやすく教えてください

13 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/13 18:53
最近人工染色体
でもBACはBACなんでないかい?

14 :名無しゲノムのクローンさん:02/09/15 01:23
ばくてりある・あーてぃふぃしゃる・くろもそーむ

15 :名無しゲノムのクローンさん:02/10/07 10:33
キアゲンで一発。Shigellaラージぷらすみっど(200Kb)
確実に取れる。

16 :名無しゲノムのクローンさん:03/01/01 21:56
しかし、そんなでかいプラスミド、どうやって作ったの?
プラスミドレスキュー?

17 :名無しゲノムのクローンさん:03/01/01 22:14
バカばっかだなこいつら
【派滅に】スレへいってこい

18 :名無しゲノムのクローンさん:03/01/01 22:25
一番の馬鹿は>>17だな

19 :名無しゲノムのクローンさん:03/01/01 22:26
いや↑だろ

20 :山崎渉:03/01/11 13:35
(^^)

21 :山崎渉:03/01/18 13:13
(^^)

22 :名無しゲノムのクローンさん:03/01/31 23:39
miniprepこれ最強。
ミトコンドリアDNAもミニプレップで取れる罠

23 :名無しゲノムのクローンさん:03/02/01 07:26
F'も?


24 :名無しゲノムのクローンさん:03/02/01 10:10
>3
150 kbどころか,300 kb位のもありますよ.
circularならCsClでもいいと思うけど,パルスフィールドで流したとき
にきれいに一本なら,linearなやつかな?
パルスフィールド後に,ゲルから切り出すのが一番と思うよ.
分解された染色体が混じるってことは,サンプルのアガープラグが良くないんだよね.
使ってる生物種はなんなの?

25 :名無しゲノムのクローンさん:03/02/01 13:33
おおきなのっぽのプラスミド
おじいさんのプラスミド

26 :名無しゲノムのクローンさん:03/02/27 09:47


葉緑体DNAもアルカリ法でとりました。

27 :名無しゲノムのクローンさん:03/03/03 21:14
        __,,,,_,,,,,_      出席番号27番・宮崎のどかが27getしました。。。
      ,,-'"::::::::::::::::::::`:ヽ     >>28私は図書委員です。   
     /:::   : : : : :    .:\   >>29私は図書館探検部員でもあります。
     /:::: ::::::::::::::..........::::::::::::. ::ヽ  >>30よくドジといわれますが、そんなことはありません。
    !::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::i  >>31うちは本屋ではありません。
    .|::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::|  >>32同姓の某被告とは全くの赤の他人です。
   |:イ::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::|  >>33明日菜さんはパイパンでしたか…
    .!l.|:::::::::、:::::::;::::::::::;:::::i:::::;:::::::::|  >>34木乃香さんは学園長先生のお嬢さんではなく、お孫さんです。
    !.|:::::::::| !トk!ヾ、i;ハヅ!!イ!:::::::|   >>35あやかさんはショタコンではないと信じています…
      |::;::::::!        ,i:::::::::|   >>36まき絵さんが1番人気とはちょっと意外です…
      .!ト::::、:ヽ、  ̄  , イ:i::::::::!   >>37無理に痩せる五月さんより今の五月さんの方が良いと思います。
     !ヽ::!^ | ` ‐ '" | '"1/レ'   >>38教室に幽霊が出没? 聞いたことはありませんが…
       ` /!\  /゙iヽ '     >>39すみません、手持ちの図書券がなくなってしまいました…
    _,,-‐'/ !  >く  | !`ー 、    >>40それでは次回の私の活躍をお楽しみに。。。

28 :山崎渉:03/03/13 13:50
(^^)

29 :山崎渉:03/03/13 13:58
(^^)

30 :名無しゲノムのクローンさん:03/03/20 00:29

           ,...,_
          /""`'・.,
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     ./=ー'"~"`ー-.,_~"\-.,_  ,...,_ "";.-、::/ノ::: 'i,
    / ̄    :::::〜`i.():::\`""| `(^);;;;;|;;/;:::::::: 'i,
  . /         ::::::`i |:::::):;;;;;i、,/人_ノ;;;;'i,::::::::::: i
   |      @   .:::::::|/::::└ー-,;;;\;i;;;;|/;:::::::::::: i
   i.,_,.人       ..::::::/ :::::::::::::/;;;;;;;'i,'i;;;;|\;:::::::::::: i
      `;      .::...:::::/  :::::::::::`- .,_;;;;i,ノ;|;;;/;:::::::::::: /
      `、.,..:::::::::::::::::/   :::::::::::::::;;;;;;\,i ,/;;;;;:::::::::::|/
        `i"`-.,_,.ノ   ::::::::::::::::;;;;;;;;;;;\|;;;;::::::::::::|
        |       :::::::::::::::::::;;;;;;;();;||;;;::::::::: .ノ


これでがまんして




31 :名無しゲノムのクローンさん:03/03/20 01:04
>>30
か、か、かわいい・・・

32 :山崎渉:03/04/17 09:31
(^^)

33 :名無しゲノムのクローンさん:03/04/18 22:40
(1)って何だろう...

34 :山崎渉:03/04/20 04:15
   ∧_∧
  (  ^^ )< ぬるぽ(^^)

35 :山崎渉:03/05/22 00:17
━―━―━―━―━―━―━―━―━[JR山崎駅(^^)]━―━―━―━―━―━―━―━―━―

36 :山崎渉:03/05/28 14:32
     ∧_∧
ピュ.ー (  ^^ ) <これからも僕を応援して下さいね(^^)。
  =〔~∪ ̄ ̄〕
  = ◎――◎                      山崎渉

37 :名無しゲノムのクローンさん:03/06/02 03:20
>>3
TiやRiなんかはデカいでしょ。

>>1
もう見てないと思うけど見てたらここ10年くらいの情報調べてみな。
200kくらいのCircularなら確実に綺麗に採れる方法あるよ。

38 :なまえをいれてください:03/07/24 18:11
ハッキリ言ってアメリカなどの多民族国家では黒人の方がアジア人よりもずっと立場は上だよ。
貧弱で弱弱しく、アグレッシブさに欠け、醜いアジア人は黒人のストレス解消のいい的。
黒人は有名スポーツ選手、ミュージシャンを多数輩出してるし、アジア人はかなり彼らに見下されている。
(黒人は白人には頭があがらないため日系料理天などの日本人店員相手に威張り散らしてストレス解消する。
また、日本女はすぐヤラせてくれる肉便器としてとおっている。
「○ドルでどうだ?(俺を買え)」と逆売春を持ちかける黒人男性も多い。)
彼らの見ていないところでこそこそ陰口しか叩けない日本人は滑稽。

39 :名無しゲノムのクローンさん:03/08/31 13:46
ちんこ

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